熒光原位雜交技術(shù)（FISH）

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熒光原位雜交（Fluorescence In Situ Hybridization，F(xiàn)ISH）是臨床病理檢測中廣泛運(yùn)用的一種分子細(xì)胞遺傳學(xué)診斷技術(shù)，其原理是用熒光染料直接或間接標(biāo)記的DNA核酸探針與待測樣本中的DNA核酸序列按照堿基互補(bǔ)配對的原則進(jìn)行雜交，然后通過熒光顯微鏡觀察熒光信號位置、數(shù)量等來判斷待測序列的缺失、擴(kuò)增及易位等情況。

FISH熒光原位雜交原理（來源NIH）

目前這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于染色體精細(xì)結(jié)構(gòu)變異分析、動植物基因組結(jié)構(gòu)研究、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學(xué)、基因組進(jìn)化研究、病毒感染分析等眾多領(lǐng)域。在臨床中應(yīng)用較多的有以下幾種：

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（1）乳腺癌Her-2/neu基因檢測，乳腺癌細(xì)胞中Her-2/neu基因的擴(kuò)增一般預(yù)示著患者預(yù)后較差，應(yīng)用針對該基因異常擴(kuò)增的靶向治療藥物，能特異性地控制癌細(xì)胞的生長，改善病人預(yù)后。Her-2/neu擴(kuò)增是靶向藥物使用的關(guān)鍵指標(biāo)，而檢測Her-2/neu擴(kuò)增的金標(biāo)準(zhǔn)即為FISH

MC50-S拍攝的兩種Her-2檢測結(jié)果（紅多于綠表示擴(kuò)增，要用藥）

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（2）宮頸癌TERC基因檢測，準(zhǔn)確區(qū)分宮頸細(xì)胞高度癌前病變與低度癌前發(fā)育異常，靈敏度和特異性超過百分之90；

（3）膀胱癌3、9、7、17號染色體數(shù)目異常檢測，使用樣本為尿液，屬于無創(chuàng)性早期診斷；

（4）產(chǎn)前檢測，13、18、21、X、Y染色體數(shù)目異常檢測，及時發(fā)現(xiàn)異常胎兒并判斷染色體疾病種類；

（5）血液腫瘤檢測，通過FISH檢測特定基因，可準(zhǔn)確預(yù)測預(yù)后及指導(dǎo)臨床個性化治療。

FISH技術(shù)本質(zhì)是對遺傳物質(zhì)進(jìn)行檢測，所使用的標(biāo)本類型可以包括1、遺傳病：外周血、羊水、絨毛、胎兒臍帶血，或羊水和絨毛的間期細(xì)胞；2、血液?。和庵苎蚬撬璧娜旧w或間期細(xì)胞；3、實(shí)體腫瘤（包括骨髓活檢）。理論上講，任何含有足夠癌細(xì)胞或DNA的組織、細(xì)胞或體液（如胸水、腹水等）標(biāo)本都可進(jìn)行相應(yīng)的基因狀態(tài)檢測。

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總體而言，F(xiàn)ISH可以檢測100kb左右的異常，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于明場下核型分析的分辨率，同時由于是原位雜交，可以直接體現(xiàn)異常細(xì)胞百分比，對于臨床后期治療有著很強(qiáng)的指導(dǎo)作用，且耗時短，操作簡單，已逐步成為臨床檢測、預(yù)后監(jiān)測、用藥指導(dǎo)等不可或缺的技術(shù)手段。