暗場(chǎng)觀察是一種利用傾斜照明來(lái)增強(qiáng)樣品在正常照明條件下成像不佳的對(duì)比度的技術(shù)，在直射光被聚光鏡中的不透明光闌遮擋后，從傾斜角度穿過(guò)樣品的光線被衍射、折射并反射到顯微鏡物鏡中，以形成疊加在深色背景上的標(biāo)本的明亮圖像。

暗場(chǎng)觀察的原理其實(shí)是根據(jù)光學(xué)上的丁道爾現(xiàn)象，微塵在強(qiáng)光直射通過(guò)的情況下，人眼不能觀察，這是因?yàn)閺?qiáng)光繞射造成的。若把光線斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了體積，為人眼可見。

暗場(chǎng)觀察需要特殊的暗視野聚光鏡，不讓光束由下至上的通過(guò)被檢物體，而是將光線改變途徑，使其斜射向被檢物體，使照明光線不直接進(jìn)入物鏡，利用被檢物體表面反射或衍射光形成的明亮圖象。

暗場(chǎng)觀察的特點(diǎn)是能夠觀察到極其微小的物體，分辨率可達(dá)0.02~0.004微米，缺點(diǎn)是只能觀察到物體存在、運(yùn)動(dòng)和外部形態(tài)不方便調(diào)節(jié)，標(biāo)本要求比較高。